Гистологическое исследование: когда оно назначается, как проводится и что показывает
Среди основных методов лабораторной диагностики новообразований, гистологическое исследование биопсийного материала занимает одно из главных мест. Оно позволяет оценить структуру и состояние клеток с высокой точностью и установить правильный диагноз, а также контролировать эффективность проводимой терапии.
Гистологическое исследование — это метод оценки клеток биоптата (образца пораженной ткани), проводимый с помощью микроскопа. Несмотря на свою простоту, данный метод довольно сложен, так как он предусматривает различные технологии обработки биоматериала и методы микроскопии.
В качестве биоматериала для исследования используются образцы различных тканей, включая кожу, слизистые оболочки и мышцы. Кроме того, иногда гистологическому исследованию подвергают мазок, то есть клетки эпителия, которые сняты специальной мягкой щеточкой.
Интересно отметить, что первые шаги в развитии гистологии были предприняты еще врачами античности и средневековья. Такие светила медицины, как Авиценна и Везалий, уже тогда уделяли большое внимание изучению тканей. Однако изучение клеток на уровне микроскопа стало возможным только в 17 веке, после изобретения первого микроскопа.
Анализ: способы и методы
Проведение гистологического анализа предусматривает применение различных подходов микроскопии, которые определяются целями исследования. Необходимость в качественном или количественном определении, а также выявление химического состава или патологических изменений структуры определяют выбор метода.
В зависимости от поставленной задачи могут применяться следующие методы микроскопии:
- Световая микроскопия. Этот метод предусматривает просвечивание образца в видимой части спектра.
- Фазово-контрастная микроскопия, которая позволяет изучать клетки без окрашивания. Она может быть дополнена темнопольной микроскопией, при которой получается негативное изображение.
- Интерференционная микроскопия. Применение данного метода позволяет определять концентрацию вещества в клетке и проводить количественные морфологические измерения.
- Поляризационная микроскопия, которая позволяет определять характер расположения молекул в клетке.
- Люминесцентная (флуоресцентная) микроскопия, при которой клетки окрашиваются специальными красителями и светятся под флуоресцентным освещением.
- Ультрафиолетовая микроскопия, применение которой предусматривает просвечивание образца в ультрафиолетовой части спектра.
- Электронная микроскопия, при которой просвечивание образца осуществляется направленным пучком электронов.
- Радиоавтография, исследование, основанное на использовании изотопных меток, которое позволяет оценить скорость обменных процессов в клетке.
- Цитоспектрофотометрия - метод изучения химического состава клетки.
Каждый из перечисленных методов микроскопии имеет свои преимущества и должен быть выбран с учетом цели исследования. Однако, несмотря на разные технологии, все они позволяют получить важные данные о структуре и функционировании тканей и органов.
В медицине гистологическое исследование является неотъемлемой частью диагностики многих заболеваний. Оно наиболее востребовано при изучении новообразований, где позволяет определить тип опухоли (доброкачественный или злокачественный), прогнозировать дальнейший рост, а также определить результативность терапии. Использование этого метода диагностики распространено в многих областях медицины, включая гастроэнтерологию, оториноларингологию, гинекологию, урологию, гематологию, пульмонологию, нефрологию и другие.
Показания к проведению гистологического исследования включают подозрения на наличие опухоли, а также необходимость определения стадии её развития. Этот метод диагностики также используется для контроля и коррекции эффективности противоопухолевой терапии.
Ограничениями для проведения гистологического исследования могут стать нарушения свертываемости крови, аллергия на анестетики (которые используются для проведения биопсии), тромбоцитопения, риск прерывания беременности (если исследование проводят у беременных женщин), а также некоторые заболевания, включая сердечную недостаточность.
Противопоказаний у метода практически нет, главное условие - возможность взять биоптат, который будет испробован на гистологическое исследование.
Гистологическое исследование включает в себя ряд этапов.
Первый этап - подготовка материала. Пробы биологических тканей, полученных от пациента в рамках диагностического процесса, предварительно фиксируют в формалине, чтобы остановить биохимические процессы в клетках.
Второй этап - удаление воды. После фиксации ткань промывают и дезгидратируют в спирте разной концентрации. Это необходимо для того, чтобы удалить воду из клеток и заменить ее на спирт, который лучше переносят последующие этапы обработки.
Третий этап - проникновение в таксолог. В ткань вводят смесь таксола и парафина, которые смешиваются со спиртом. Это помогает удалить спирт из ткани и заменить его на парафин, который защищает ткани от повреждений и сохраняет их структуру.
Четвертый этап - формирование блока. Ткань помещают в металлические формы, в которых застывает парафин. В итоге получается блок, который можно нарезать на тонкие срезы размером до нескольких микрометров.
Пятый этап - получение микроскопических срезов. Раскрой блока происходит в микротоме, и ткань нарезают на срезы, которые окрашивают специальными красителями.
Шестой этап - получение гистологического препарата. Тонкие срезы клеят на стеклянную пластинку и закрепляют лаком. Гистологический препарат готов.
Следует отметить, что гистологическое исследование является важным этапом в диагностическом процессе и может помочь выявить ряд заболеваний.
Готовимся к исследованию
Важно учитывать метод и расположение точки взятия биоптата. Обычно процедуру назначают на утро и желательно делать ее натощак, поскольку часто используется местное обезболивание или успокоительное. Поэтому последний прием пищи должен быть не менее, чем за 8 часов до процедуры.
Для гистологического исследования материала используется так называемая биопсия. Она может проводиться несколькими разными способами.
Первый способ - во время хирургической операции, когда врач берет образец пораженной ткани (инцизионная биопсия).
Второй способ - щипковая биопсия, когда специальными щипчиками, зачастую эндоскопическим методом, берется частичка материала.
Третий способ - пункционная биопсия, которая включает забор материала толстой иглой. Он часто применяется для получения образца клеток из печени и простаты.
Четвертый способ - аспирационная биопсия, при которой образец тканей получают путем отсасывания маленькой трубкой. Этот способ используют для биопсии узлов щитовидной железы, миоматозных узлов и прочих.
Пятый способ - эксцизионная биопсия, когда пораженные органы и ткани удаляются хирургическим путем с последующим их исследованием.
Шестой способ - трепан-биопсия, применяется для забора жидкостей из костной ткани.
Седьмой способ - кюретаж, при котором соскабливается небольшое количество ткани из полости при помощи специальной ложечки-кюреты с острыми краями.
Восьмой способ - мозок, при этом забираются клетки слизистых оболочек при помощи тонкой щетки, похожей на туш для глаз.
Забор биоптата - это безопасная процедура, которая проводится под контролем УЗИ и не представляет риска повреждения органов.
Анализ материала
В медицине существуют две основные методики проведения гистологического исследования.
Традиционный подход предполагает обработку полученного биоптата с помощью фиксирующего вещества, которое предотвращает его разложение под действием ферментов, а также его сгущение путём заливки парафином. Затем готовый препарат нарезают микротомом на «ломтики» толщиной около 8 мкм и окрашивают. После этого препарат изучают при помощи микроскопа и делают заключение. Обычно результаты исследования становятся доступными через 7 до 10 дней, однако для исследования костной ткани может потребоваться около 2 недель.
Иногда результаты гистологического исследования необходимы врачу немедленно, в течение часа, например, при проведении операции, когда врачей волнует вопрос о немедленном удалении или сохранении органа. В таких случаях применяется ускоренная методика гистологического исследования, при которой биоптат замораживают, нарезают микротомом и проводят микроскопию немедленно. Такой подход занимает всего лишь час или ещё меньше.
Значительно чаще для гистологического исследования выбирают биоптат, расположенный на границе между здоровой и пораженной областями.
Принципы трактовки результатов гистологического исследования
В медицине гистологическое исследование является одним из самых точных методов лабораторной диагностики. Ошибки крайне редки и могут быть вызваны только нарушением технологии при заборе биоматериала. Результат гистологического исследования выдается в виде медицинского документа, который может интерпретировать только врач.
Бланк результатов гистологического исследования содержит имя и данные пациента, дату и место забора биоматериала, тип исследованных тканей, способ исследования, а также список растворов и препаратов, использованных во время подготовки образца тканей.
Объем заключения гистологического исследования может вызывать беспокойство у пациентов, поскольку оно может включать огромное количество названий тканей. Однако не следует беспокоиться зря, поскольку в заключении специалист описывает все типы обнаруженных тканей, даже если они совершенно здоровы.
Каждый тип тканей оценивается по нескольким параметрам, таким как цвет, консистенция и плотность, наличие изменений, не вписывающихся в норму, например, прорастание и размягчение.
Исследование: сколько стоит?
Многие хотят знать, сколько стоит гистологическое исследование. Оно может выглядеть сложным, но на самом деле оно не так уж дорого. В муниципальных медицинских учреждениях, если у пациента есть полис, оно делается бесплатно. Единственный недостаток заключается в том, что государственные лаборатории могут быть перегружены, что приводит к длительному ожиданию направлений на биопсию и результатов анализа. По этой причине многие соглашаются заплатить за услуги, чтобы пройти исследование быстрее.
Стоимость гистологического исследования в коммерческих лабораториях составляет примерно от 3000 до 4000 рублей. Стоимость биопсии, как таковой, начинается от 1500–2000 рублей и может доходить до 8000 рублей в зависимости от сложности, способа проведения и типа биоматериала.
Однако, проведение гистологического исследования требует, чтобы технология забора биоптата, его упаковки и перевозки была строго соблюдена. Это особенно важно, если транспортировка биоматериала от места забора до лаборатории будет долгой. Поэтому желательно, чтобы забор и исследование материала проходили в одном и том же месте (если есть такая возможность) в лаборатории, оснащенной современным оборудованием.
Фото: freepik.com